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                            技術(shù)文章 / article 您的位置:網(wǎng)站首頁(yè) > 技術(shù)文章 > ELISA檢測(cè)樣本的處理

                            ELISA檢測(cè)樣本的處理

                            發(fā)布時(shí)間: 2023-10-12  點(diǎn)擊次數(shù): 504次

                             

                            在收集標(biāo)本前需有一個(gè)完整的計(jì)劃,需要清楚要檢測(cè)的成份是否足夠穩(wěn)定。ELISA檢測(cè)提倡新鮮標(biāo)本盡早檢測(cè),對(duì)收集后當(dāng)天就進(jìn)行檢測(cè)的標(biāo)本,及時(shí)儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆茫缬刑厥庠蛐枰芷谑占瘶?biāo)本,請(qǐng)取材后,將標(biāo)本及時(shí)分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。因冰室與室溫存在一定溫差,蛋白極易降解,直接影響實(shí)驗(yàn)質(zhì)量,所以避免反復(fù)凍融。


                            ◇ 液體類(lèi)標(biāo)本:

                            包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。


                            ◇ 血清:

                            室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。


                            ◇ 血漿:

                            應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。


                            ◇ 尿液:

                            用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。


                            ◇ 細(xì)胞培養(yǎng)上清:

                            檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。


                            ◇ 組織標(biāo)本:

                            切割標(biāo)本后,稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。 

                             

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